本周的業務學習，免疫室團隊分享了一例B肝五項檢測結果假陽性的案例。大家積極參與，認真讨論，得出了一些共識，對于酶免法的優劣勢有了深刻的了解。
案例經過
患者：全某，男，58歲，來自風濕免疫科，已确診為類風濕性關節炎。2021年12月9日，抽血進行傳染病篩查。因患者為新農合醫保，按照規定，我們對該份标本采用酶免法進行傳染病四項檢測，首次結果如下。
從上化驗結果可知，患者B肝五項結果為“大三陽”，處于乙型肝炎活動期。免疫室同仁出于工作習慣，采用酶免法進行複查，結果仍然為“大三陽”。後采用電化學發光方法對本份标本再次進行檢測。結果竟截然相反，所有名額均為陰性。
從檢測技術角度而言，盡管電化學發光檢測無論是在靈敏度、特異性方面，均優于酶免法。但是酶免作為極為常用的檢測方法，有着相當的準确性。然而，為何此患者兩種方法的結果卻迥異呢？難道是酶免法檢測結果有失精準嗎？
為了進一步核實結果到底如何，免疫室同仁把标本送至試劑生産廠家，後者采用PEG及高速離心等方法對标本進行處理後，再次進行檢測，結果均為陰性。表明此次檢測，酶免法對于此标本的檢測存在假陽性問題。
免疫室彙報後，各專業組同仁紛紛提出問題，并進行讨論。
問題一：酶免法是傳統的傳染病篩查方法，初次及首次複查結果均為“大三陽”，為何想到采用電化學發光技術複查？
免疫室同仁解釋，結果複查的原因主要有兩點。
1.盡管顯示為“大三陽”，但是吸光度值均在臨界值左近，這樣的區間，容易出現假陽或假陰性結果。
2.患者為活動期類風濕性關節炎，此類患者體内可存在大量的幹擾性抗體成分，容易造成結果的假陽性。
問題二：哪些影響因素容易造成酶免法檢測結果的異常?
ELISA操作包括試劑和樣本準備、加樣、溫育、洗闆、顯色和比色等步驟。每個環節的不規範操作均會對測定結果産生影響，此外，患者标本中也可能存在幹擾酶免疫測定的内源性和外源性因素。
1.标本的内源性因素 如護士采血污染、标本含有類風濕因子（RF）、補體、異嗜性抗體等。
2.臨界值的設定偏低 ELISA以臨界值來判斷結果，若OD值處于檢測臨界值“灰區”時，可能得出假陽/假陰性結果。
3.批量檢測标本時，若洗闆機有限會造成等待時間延長，繼而造成溫育時間延長，導緻異常結果出現。
問題三、本次結果異常到底是哪種原因？
通過跟蹤患者的檢測資訊，找到了造成假陽性結果的關鍵原因，即患者的IgM型類風濕因子濃度極高，且部分自身免疫性抗體也為陽性且有相當的滴度。
4.如何有效規避幹擾因素造成的酶免法檢測結果異常？
在實驗室現有的條件下，為了減少假陽性産生的幾率，可以根據實情采取以下措施。
1.制定嚴格的實驗室内操作規程，但凡OD值較低，或特殊病人如自身免疫病患者均需複查結果。
2.做好标本的前處理，盡量使用真空采血管，離心充分（天氣較冷時，血液标本先放37℃水浴１~２ｈ），無溶血、脂血、纖維蛋白絲。
3.選擇公認的、品質較好的試劑，且不同批号試劑不混用。
4.做好儀器裝置的日常保養和定期校準。
5.設定适合自己實驗室的“灰區”，對處于灰區的标本加強複查。同時密切結合其他臨床資料和實驗室結果，必要時随訪。
6.使用自帶陰、陽性标準品和合适的弱陽性質控物進行室内質控。
7.标本量過大時，可以分批次錯時操作，確定溫育時間準确。
8.有條件的實驗室可以開展中和試驗。
檢以求真，驗以求實，但凡精準檢驗，均需嚴謹的工作态度及豐富的專業知識做支撐。
來源：德安實驗診斷
編輯：任裡程 審校：小冉