2月8日，54名乘客從英國轉機丹麥回國，因核酸檢測結果為“陽性”，而被滞留在丹麥哥本哈根機場的消息引發關注。
上述54名乘客自英國倫敦乘坐班機出發，目的地為中國上海，飛機于當天下午到達丹麥哥本哈根機場轉機。
根據當地防疫要求，全機人員進行核酸檢測。但在該航班起飛前，機上200名乘客中的54人卻接到機場方面的通知，稱檢測結果為“陽性”，無法登機前往上海，需要就地隔離或是傳回英國。
這54名乘客大多數為中國留學生，滞留乘客認為：這一集體“陽性”事件應當被認定為重大醫療誤診!
留學生李女士介紹，當天初次核酸檢測陽性的有54人，但當時機場的從業人員并未給到他們紙質的檢測報告，而是口頭通知他們為陽性（後經大使館協調才拿到紙質報告），并讓他們根據防疫要求到丹麥酒店進行隔離或是買機票傳回英國。
陽性報告
李女士表示，根據防疫要求，機上所有乘客于起飛前7天和48小時内，在英國做了雙核酸檢測或者核酸+IgM+N蛋白三檢，才拿到中國駐英國大使館出具的綠碼乘機。
是以，對于哥本哈根機場的核酸“陽性”結果，衆多乘客提出了質疑。在集體要求下，當晚所有滞留人員又再次支付25英鎊進行一對一的快速核酸檢測，檢測結果全變成“陰性”。
此時，中國駐丹麥大使館從業人員趕到現場。在使館方面的協調下，滞留人員拿到兩份“一陽一陰”的報告，但飛往國内的航班已經飛走。
陰性報告
在這麼短的時間内
核酸檢測結果陰陽反轉
究竟哪裡出了問題？
滞留乘客在複盤事件時發現，飛機上有近200人，而54名“陽性”人員雖坐在飛機的不同區域，但均由同一位檢測人員進行檢測。他們有理由懷疑：一次醫療誤診事件。
乘客Wendy介紹，這名檢測人員是一位年齡較大的女護士，其檢測速度較快，“檢測棉簽是幹爽又白淨的，而這位護士用的棉簽是黃褐色的，濕漉漉的。”
前述李女士也稱，因這位護士處沒人排隊，便被拉到此處檢測，且在進行檢測時，該人員操作不規範，“口罩隻戴了一半，鼻子露在外面，不戴手套，手部沒有消毒就直接撕開檢測包裝。”
那麼，新冠核酸檢測“假陽性”除了在采樣過程中出現的污染之外，在實驗室檢測過程中還有哪些因素會導緻“假陽性”呢？
出現假陽性的原因主要有以下幾個方面:
1.引物設計不合适
選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行PCR擴增時，擴增出的PCR産物為非目的基因序列。但在臨床實際中，由于基本使用的是成品試劑盒，引物設計不合适的情況一般不會出現，但個别廠家試劑仍存在非特異性擴增現象，建議在使用前進行性能評價，比對篩選。
2.靶序列或擴增産物的交叉污染
這種污染有兩種原因，第一是整個基因組或大片段的交叉污染導緻假陽性。第二是空氣中的小片段核酸污染，雖然這些小片段比靶基因序列短，但有一定的同源性。互相拼接後與引物互補結合，可擴增出PCR産物，而導緻假陽性的産生。在規範操作的前提下，應該盡量避免第二種情況的發生。
3.标本間交叉污染
标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有标本而造成互相間交叉污染；标本核酸模闆在提取過程中，由于吸樣槍污染導緻标本間污染；有些微生物标本尤其是病毒可随氣溶膠或形成氣溶膠而擴散，導緻彼此間的污染。
4.PCR試劑的污染
主要是由于在PCR試劑配制過程中，由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被PCR核酸模闆污染。
5.實驗室中克隆質粒的污染
試劑盒中的陽性對照參與核酸提取過程造成交叉污染，一些試劑盒為了監控核酸提取過程的品質，要求将試劑盒中的陽性對照（含有目的基因的假病毒）與樣本一起進行核酸提取，自動化的核酸提取儀由于加溫、振動等過程，在操作過程中氣溶膠可能會污染提取儀。
有的實驗室可能會将提取的核酸樣本闆加膜儲存，以備擴增，再次打開封膜的樣本闆時可能會造成交叉污染。是以，不建議對提取後的樣本核酸封膜儲存，最好立即檢測，同時，應對每一批提取後的儀器用75%酒精擦拭。
當PCR實驗結果出現假陽性的時候，我們常常會考慮是不是引物、反應液、移液器等污染模闆，然後需要一一排查，費時費力。
其實産生這一現象最常見的原因是核酸氣溶膠。離心機離心、劇烈地搖動反應管、PCR開蓋、移液器的反複吹打等會産生空氣與液體表面摩擦的情況，都會産生核酸氣溶膠，也就是實驗室裡（或移液器腔内）彌漫着含有長短不一核酸片段的小顆粒，這些小顆粒沉降到樣本中導緻最後擴增出了假陽性熒光曲線。
可想而知，這些核酸小顆粒還會落到實驗台面、PCR儀、移液器、吸頭盒等等地方，如果我們不注意，這些核酸小顆粒就會日積月累地積聚，當實驗室裡核酸氣溶膠的濃度達到一定濃度，就會造成實驗室的污染進而産生PCR實驗結果的假陽性。
細節決定成敗，尤其對于實驗環境和操作要求極高的核酸實驗室，任何一個環節做不好都可能影響整個實驗結果。我們所有檢驗人員隻有把防污染思想貫徹于整個實驗過程中，才能有效避免假陽性的産生，保證準确的核酸檢測結果。
圖源：紅星新聞等
來源：極目新聞、紅星新聞、大醫一院檢驗科等
編輯：任裡程 審校：小冉