2月8日，54名乘客从英国转机丹麦回国，因核酸检测结果为“阳性”，而被滞留在丹麦哥本哈根机场的消息引发关注。
上述54名乘客自英国伦敦乘坐班机出发，目的地为中国上海，飞机于当天下午到达丹麦哥本哈根机场转机。
根据当地防疫要求，全机人员进行核酸检测。但在该航班起飞前，机上200名乘客中的54人却接到机场方面的通知，称检测结果为“阳性”，无法登机前往上海，需要就地隔离或是返回英国。
这54名乘客大多数为中国留学生，滞留乘客认为：这一集体“阳性”事件应当被认定为重大医疗误诊!
留学生李女士介绍，当天初次核酸检测阳性的有54人，但当时机场的工作人员并未给到他们纸质的检测报告，而是口头通知他们为阳性（后经大使馆协调才拿到纸质报告），并让他们根据防疫要求到丹麦酒店进行隔离或是买机票返回英国。
阳性报告
李女士表示，根据防疫要求，机上所有乘客于起飞前7天和48小时内，在英国做了双核酸检测或者核酸+IgM+N蛋白三检，才拿到中国驻英国大使馆出具的绿码乘机。
因此，对于哥本哈根机场的核酸“阳性”结果，众多乘客提出了质疑。在集体要求下，当晚所有滞留人员又再次支付25英镑进行一对一的快速核酸检测，检测结果全变成“阴性”。
此时，中国驻丹麦大使馆工作人员赶到现场。在使馆方面的协调下，滞留人员拿到两份“一阳一阴”的报告，但飞往国内的航班已经飞走。
阴性报告
在这么短的时间内
核酸检测结果阴阳反转
究竟哪里出了问题？
滞留乘客在复盘事件时发现，飞机上有近200人，而54名“阳性”人员虽坐在飞机的不同区域，但均由同一位检测人员进行检测。他们有理由怀疑：一次医疗误诊事件。
乘客Wendy介绍，这名检测人员是一位年龄较大的女护士，其检测速度较快，“检测棉签是干爽又白净的，而这位护士用的棉签是黄褐色的，湿漉漉的。”
前述李女士也称，因这位护士处没人排队，便被拉到此处检测，且在进行检测时，该人员操作不规范，“口罩只戴了一半，鼻子露在外面，不戴手套，手部没有消毒就直接撕开检测包装。”
那么，新冠核酸检测“假阳性”除了在采样过程中出现的污染之外，在实验室检测过程中还有哪些因素会导致“假阳性”呢？
出现假阳性的原因主要有以下几个方面:
1.引物设计不合适
选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行PCR扩增时，扩增出的PCR产物为非目的基因序列。但在临床实际中，由于基本使用的是成品试剂盒，引物设计不合适的情况一般不会出现，但个别厂家试剂仍存在非特异性扩增现象，建议在使用前进行性能评价，比对筛选。
2.靶序列或扩增产物的交叉污染
这种污染有两种原因，第一是整个基因组或大片段的交叉污染导致假阳性。第二是空气中的小片段核酸污染，虽然这些小片段比靶基因序列短，但有一定的同源性。互相拼接后与引物互补结合，可扩增出PCR产物，而导致假阳性的产生。在规范操作的前提下，应该尽量避免第二种情况的发生。
3.标本间交叉污染
标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染；有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。
4.PCR试剂的污染
主要是由于在PCR试剂配制过程中，由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。
5.实验室中克隆质粒的污染
试剂盒中的阳性对照参与核酸提取过程造成交叉污染，一些试剂盒为了监控核酸提取过程的质量，要求将试剂盒中的阳性对照（含有目的基因的假病毒）与样本一起进行核酸提取，自动化的核酸提取仪由于加温、振动等过程，在操作过程中气溶胶可能会污染提取仪。
有的实验室可能会将提取的核酸样本板加膜保存，以备扩增，再次打开封膜的样本板时可能会造成交叉污染。因此，不建议对提取后的样本核酸封膜保存，最好立即检测，同时，应对每一批提取后的仪器用75%酒精擦拭。
当PCR实验结果出现假阳性的时候，我们常常会考虑是不是引物、反应液、移液器等污染模板，然后需要一一排查，费时费力。
其实产生这一现象最常见的原因是核酸气溶胶。离心机离心、剧烈地摇动反应管、PCR开盖、移液器的反复吹打等会产生空气与液体表面摩擦的情况，都会产生核酸气溶胶，也就是实验室里（或移液器腔内）弥漫着含有长短不一核酸片段的小颗粒，这些小颗粒沉降到样本中导致最后扩增出了假阳性荧光曲线。
可想而知，这些核酸小颗粒还会落到实验台面、PCR仪、移液器、吸头盒等等地方，如果我们不注意，这些核酸小颗粒就会日积月累地积聚，当实验室里核酸气溶胶的浓度达到一定浓度，就会造成实验室的污染进而产生PCR实验结果的假阳性。
细节决定成败，尤其对于实验环境和操作要求极高的核酸实验室，任何一个环节做不好都可能影响整个实验结果。我们所有检验人员只有把防污染思想贯彻于整个实验过程中，才能有效避免假阳性的产生，保证准确的核酸检测结果。
图源：红星新闻等
来源：极目新闻、红星新闻、大医一院检验科等
编辑：任里程 审校：小冉