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相似卻又大大不同!真菌感染診斷G試驗、GM試驗,你了解嗎?

相似卻又大大不同!真菌感染診斷G試驗、GM試驗,你了解嗎?

侵襲性真菌病是臨床常見的感染類型,學會診斷很重要。侵襲性肺真菌病臨床表現不典型易被基礎疾病所掩蓋,确診通常需要侵入性的組織标本,而侵入性的操作過程常因患者的病情所限難以實施,是以有較高的漏診率。

目前國内大多數醫院都在開展非侵襲性實驗室技術,如G試驗和GM試驗,現已成為真菌感染的診斷标準之一,以提高真菌感染的陽性率。

但G試驗、GM試驗在診斷真菌感染中究竟有多大意義?兩者有何差別?且看本文一一道來。

什麼是G試驗、GM試驗?

1、G試驗:又稱1,3-β-D葡聚糖試驗,檢測的是真菌的細胞壁成分1,3-β-D葡聚糖,人體的吞噬細胞吞噬真菌後,能持續釋放該物質,使血液及體液中含量增高。1,3-β-D葡聚糖可特異性激活鲎變形細胞裂解物(LAL)中的G因子,引起裂解物凝固,故稱G試驗。

2、GM試驗:檢測的是半乳甘露聚糖(Glactomannan,GM),半乳甘露聚糖是廣泛存在于曲黴和青黴細胞壁的一種多糖,菌細胞壁表面菌絲生長時,半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放,是最早釋放的抗原,可以通過酶聯免疫吸附試驗法進行檢測。

兩者在診斷真菌感染中的意義

根據《侵襲性肺真菌病診斷指南》,真菌感染的診斷因素包括宿主因素、臨床特征、微生物學檢查、組織病理學。确診疾病必須依賴組織病理等有創檢查和操作,培養過程又需要一定時間,進而無形中增加了漏診率。

而新的血清學診斷方法,包括G試驗、GM試驗以及對于真菌特異DNA的聚合酶鍊式反應(PCR)技術,與臨床征象、微生物培養,尤其是CT掃描一起,為開始搶先治療、監測疾病病程、評價治療反應提供了更多有參考價值的資料。其中G試驗、GM試驗連續2次陽性為有意義的檢查結果。

人體的吞噬細胞吞噬真菌後, 能持續釋放1,3-β-D葡聚糖,使血液及體液中含量增高。通過 G 試驗檢測1,3-β-D葡聚糖的含量能夠及時反映真菌感染情況。

G試驗

G試驗适用于除隐球菌和接合菌(毛黴菌)外的所有深部真菌感染的早期診斷,雖能測得包括曲黴和念珠菌在内的更多緻病性真菌,且初步的臨床研究顯示有較好的敏感性和特異性,假陽性率較低,但它隻能提示有無真菌侵襲性感染,并不能确定為何種真菌感染,這是此方法的缺陷。

同時以下情況可出現假陽性:

(1)使用纖維素膜進行血透,标本或患者暴露于紗布或其他含有葡聚糖的材料;

(2)靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品;

(3)鍊球菌血症;

(4)操作者處理标本時存在污染。

另外,使用多糖類抗癌藥物、放化療造成的粘膜損傷導緻食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經胃腸道進入血液等也可能造成假陽性。

GM試驗

GM試驗主要針對于侵襲性曲黴菌感染的早期診斷。曲黴菌感染部位主要集中在肺部,進而引起肺部侵襲性曲黴,診斷曲黴菌在肺部是定植還是侵襲性生長,關鍵在于其是否合成GM。如果痰液或肺泡灌洗液标本培養到曲黴菌,且GM試驗檢測結果為陽性,即可診斷為曲黴菌侵襲性感染。

GM試驗常可在患者臨床症狀出現前5-8天獲得陽性結果,并可對血清、腦脊液、肺泡或支氣管灌洗液進行檢測,因而往往可以使診斷提前。是以GM試驗是診斷侵襲性曲黴感染的微生物檢查證據之一,通過檢測GM值也可以作為治療效果的參考名額之一。

GM試驗對其他真菌檢測無效,且敏感性和特異性受諸多因素影響,以下情況可出現假陽性:

(1)使用使用半合成青黴素尤其是哌拉西林/他唑巴坦;

(2)新生兒和兒童;

(3)血液透析;

(4)自身免疫性肝炎等;

(5)食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。

以下情況也可出現假陰性:

(1)釋放入血循環中的曲黴GM(包括甘露聚糖)并不持續存在而是會很快清除;

(2)以前使用了抗真菌藥物;

(3)病情不嚴重;

(4)非粒細胞缺乏的患者。

臨床應用注意

(1)G試驗和GM試驗檢測的物質不同,代謝規律存在差異,影響因素也有較大差别,二者不能互相取代,二者聯合應用可以提高對侵襲性真菌病的診斷能力。

(2)GM試驗和G試驗均存在假陽性結果,可以通過多次檢測來降低假陽性率。是以,G試驗和GM試驗陽性的病例仍需結合臨床表現綜合判斷是否存在真菌感染。

(3)大陸的《侵襲性肺真菌病診斷指南》把連續2次GM陽性作為微生物感染的标準,臨床上經驗性治療早期應用,會使血清GM濃度降低,出現假陰性,連續2次血清GM陽性的标準不易達到,會給臨床醫生帶來困惑。

(4)影響GM試驗結果最常見的因素為β-内酰胺類抗菌藥物的使用,尤其是哌拉西林/他唑巴坦,是以在檢測曲黴菌半乳甘露聚糖時,應避免給患者使用此類藥物。

來源:醫學界呼吸頻道

編輯:任裡程 審校:小冉

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