公元前293年，秦國派白起前往伊阙攻打南韓，取得重大勝利，斬首24萬。秦國于是送給楚王書信說：“楚國背叛秦國，秦國準備率領諸侯讨伐楚國，決一勝負。希望您整頓士卒，得以痛快地一戰。”楚頃襄王很憂慮，就謀劃再與秦國講和。屈原堅決反對，子蘭指使靳尚到頃襄王面前進讒，使屈原第二次被流放到南方的荒僻地區。
這次流放的路線，按《哀郢》分析，是從郢都（湖北江陵縣）出發，先往東南順江而下經過夏首（湖北省荊州市沙市區東南）、遙望龍門（郢都的東門）經由洞庭湖進入長江，然後又離開了夏浦（湖北漢口），最後到了陵陽（據說是今安徽青陽縣南）。
想為楚王“奔走以先後”，“雖九死其猶未悔”的屈原，眼看着祖國一步步走向滅亡，自己卻不能有一點作為，就埋下了以身殉國的思想。
約公元年278年，他過鄂渚（湖北武昌），入洞庭，溯沅水，經枉陼 （湖南常德武陵縣）至辰陽（湖南辰溪），又折向東南，入于溆浦，暫時停留下來。不久又下沅江，入洞庭，渡湘水，到了長沙附近的汨羅江，楚都被秦攻破後，在極度苦悶、完全絕望的心情下，于農曆五月五日投江自盡了；約為前278年6月6日，頃襄王二十一年，當時屈原62歲左右。直至55年後的前223年，楚國被秦所滅。