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對蝦養殖中,DIV1是巨大的威脅!關于DIV1又有新發現!

作者:一号水産
對蝦養殖中,DIV1是巨大的威脅!關于DIV1又有新發現!

前言:

對蝦養殖中,DIV1是巨大的威脅!關于DIV1又有新發現!

一項最新研究表明,高溫會影響十足目虹彩病毒1 (DIV1) 的生長和緻病性,影響病毒在組織中的複制并影響白對蝦的存活率。是以,高水溫下養殖的蝦病毒載量較高,更容易受到DIV1感染。

十足目虹彩病毒1(DIV1)屬于虹彩病毒科,是蝦類中的一種奇怪病毒,近年來對蝦養殖業造成了巨大損害。虹彩病毒科可感染昆蟲、兩栖動物和魚類,受感染的南美白對蝦死亡率很高,15天内死亡率高達100%。蝦被DIV1感染有以下迹象:蝦體呈紅色,殼軟,沉入池底,大約兩三天後,池塘裡的蝦就會全部被感染而死亡。

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溫度波動會影響蝦的生理活動,如:生長速度、抗病力和代謝率。此外,研究表明溫度會影響不同病毒的複制率(Kan et al., 2013)。

多項研究結果表明,高水溫可降低感染WSSV病毒的蝦的死亡率(Vidal et al.,2001),抑制WSSV複制(Moser et al.,2012);Taura TSV綜合征(Coté et al.,2010)和上皮和造血壞死病毒 IHHNV(Montgomery-Brock et al.,2007)的發病率。

一、研究設定

1、随機取樣的南美白對蝦(平均重量3.58±1g)并進行PCR檢測,以確定沒有感染IHHNV、WSSV和DIV1。自然感染DIV1的蝦獲自廣東某的一個養殖場。水溫根據實驗溫度調整(26±1℃和32±1℃)。DIV1病毒樣品是從自然感染的南美白對蝦的組織中提取的。

2、南美白對蝦在不同溫度(26±1°C和32±1°C)和相同鹽度下養殖,然後注射DIV1(蝦注射50μL DIV1提取物。含有1.0 x 104 cfu/μL)。對照組的蝦保持在相同的溫度下,注射50 µL PBS。該測試分為3組,每組每池30尾蝦。

3、感染後6、12和24小時 (hpi),在每個溫度下随機取樣3尾蝦。收集鰓、肝胰腺、腹腿、腸和肌肉并放入-80°C的冰箱中(Fouzi et al.,2010)。6小時後計算每組的存活率。

二、研究成果

1、 存活率

試驗期間,南美白對蝦的成活率不斷下降。同時,在相同水溫下,實驗組(感染組)和對照組(未感染組)之間存在較大差異。實驗組96 hpi的存活率明顯低于未感染對照組。在26±1℃的溫度下,感染組的存活率為4.44%,而對照組的存活率為78.89%。另一方面,32±1℃下感染組的存活率最低,為2.22%,對照組為86.67%。26±1℃和32±1℃感染組的存活率無顯着差異,均低于5%。32±1℃比26±1℃蝦死亡要提前,可能與蝦對高水溫的易感性增加,使其更容易受到疾病、更多的DIV1感染有關。

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2、不同水溫下DIV1增殖情況

qPCR分析顯示,在DIV1感染早期,32±1℃組大多數組織中的病毒拷貝數顯着高于26±1℃組。這項研究與Cheng等人2005年的研究中溫度與病原體的相關性非常相似,表明南美白對蝦在從27-28°C變為32-34°C後的最初24小時内對溶藻弧菌更敏感(Cheng W et al.005)。在26±1°C的溫度下,每個感染組織中的DIV1拷貝數在6和24hpi時存在顯着差異。DIV1在腸道中複制速度最快,檢測到的數量最多(圖2)。在32±1°C下取樣的組織在6hpi和24hpi時也存在顯着差異。在這些組織中,肌肉組織的病毒載量最高(圖3)。

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DIV1在兩種不同的水溫下以不同的速率複制。除腸道外,6hpi 時,32 ± 1°C下的樣本組織中DIV1拷貝數高于26±1°C下的DIV1拷貝數,尤其是鰓、腹足和肌肉中的DIV1拷貝數差異顯着。12 hpi時,與26±1°C相比,32±1°C下腸道和肌肉中的拷貝數顯着更高,特别是32±1°C下肌肉中的DIV1拷貝數遠高于26±1°C下的拷貝數。然而,在24hpi時,26±1℃時鰓、肝胰腺、腿和腸中的DIV1拷貝數遠高于32±1℃時,而32℃時肌肉中的DIV1拷貝數遠高于26±1°C。

三、得出結論

在測試的兩種水溫下,DIV1感染組和對照組之間的存活率和病毒載量存在顯着差異。在這兩個測試溫度下,感染DIV1的蝦的存活率在30 hpi時下降至 5%。這項研究表明,将南美白對蝦轉移到較高的水溫中對DIV1感染造成的損害沒有有益的影響。感染DIV1的南美白對蝦在26±1℃下48小時記憶體活率下降至4.44%,在32±1℃下30小時内下降至2.22%。高水溫養殖的南美白對蝦病毒載量高,更容易感染DIV1。在32±1°C時,幾乎所有組織都在第一感染階段達到病毒載量門檻值。

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