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对虾养殖中,DIV1是巨大的威胁!关于DIV1又有新发现!

作者:一号水产
对虾养殖中,DIV1是巨大的威胁!关于DIV1又有新发现!

前言:

对虾养殖中,DIV1是巨大的威胁!关于DIV1又有新发现!

一项最新研究表明,高温会影响十足目虹彩病毒1 (DIV1) 的生长和致病性,影响病毒在组织中的复制并影响白对虾的存活率。因此,高水温下养殖的虾病毒载量较高,更容易受到DIV1感染。

十足目虹彩病毒1(DIV1)属于虹彩病毒科,是虾类中的一种奇怪病毒,近年来对虾养殖业造成了巨大损害。虹彩病毒科可感染昆虫、两栖动物和鱼类,受感染的南美白对虾死亡率很高,15天内死亡率高达100%。虾被DIV1感染有以下迹象:虾体呈红色,壳软,沉入池底,大约两三天后,池塘里的虾就会全部被感染而死亡。

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温度波动会影响虾的生理活动,如:生长速度、抗病力和代谢率。此外,研究表明温度会影响不同病毒的复制率(Kan et al., 2013)。

多项研究结果表明,高水温可降低感染WSSV病毒的虾的死亡率(Vidal et al.,2001),抑制WSSV复制(Moser et al.,2012);Taura TSV综合征(Coté et al.,2010)和上皮和造血坏死病毒 IHHNV(Montgomery-Brock et al.,2007)的发病率。

一、研究设置

1、随机取样的南美白对虾(平均重量3.58±1g)并进行PCR检测,以确保没有感染IHHNV、WSSV和DIV1。自然感染DIV1的虾获自广东某的一个养殖场。水温根据实验温度调整(26±1℃和32±1℃)。DIV1病毒样品是从自然感染的南美白对虾的组织中提取的。

2、南美白对虾在不同温度(26±1°C和32±1°C)和相同盐度下养殖,然后注射DIV1(虾注射50μL DIV1提取物。含有1.0 x 104 cfu/μL)。对照组的虾保持在相同的温度下,注射50 µL PBS。该测试分为3组,每组每池30尾虾。

3、感染后6、12和24小时 (hpi),在每个温度下随机取样3尾虾。收集鳃、肝胰腺、腹腿、肠和肌肉并放入-80°C的冰箱中(Fouzi et al.,2010)。6小时后计算每组的存活率。

二、研究成果

1、 存活率

试验期间,南美白对虾的成活率不断下降。同时,在相同水温下,实验组(感染组)和对照组(未感染组)之间存在较大差异。实验组96 hpi的存活率明显低于未感染对照组。在26±1℃的温度下,感染组的存活率为4.44%,而对照组的存活率为78.89%。另一方面,32±1℃下感染组的存活率最低,为2.22%,对照组为86.67%。26±1℃和32±1℃感染组的存活率无显着差异,均低于5%。32±1℃比26±1℃虾死亡要提前,可能与虾对高水温的易感性增加,使其更容易受到疾病、更多的DIV1感染有关。

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2、不同水温下DIV1增殖情况

qPCR分析显示,在DIV1感染早期,32±1℃组大多数组织中的病毒拷贝数显着高于26±1℃组。这项研究与Cheng等人2005年的研究中温度与病原体的相关性非常相似,表明南美白对虾在从27-28°C变为32-34°C后的最初24小时内对溶藻弧菌更敏感(Cheng W et al.005)。在26±1°C的温度下,每个感染组织中的DIV1拷贝数在6和24hpi时存在显着差异。DIV1在肠道中复制速度最快,检测到的数量最多(图2)。在32±1°C下取样的组织在6hpi和24hpi时也存在显着差异。在这些组织中,肌肉组织的病毒载量最高(图3)。

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DIV1在两种不同的水温下以不同的速率复制。除肠道外,6hpi 时,32 ± 1°C下的样本组织中DIV1拷贝数高于26±1°C下的DIV1拷贝数,尤其是鳃、腹足和肌肉中的DIV1拷贝数差异显着。12 hpi时,与26±1°C相比,32±1°C下肠道和肌肉中的拷贝数显着更高,特别是32±1°C下肌肉中的DIV1拷贝数远高于26±1°C下的拷贝数。然而,在24hpi时,26±1℃时鳃、肝胰腺、腿和肠中的DIV1拷贝数远高于32±1℃时,而32℃时肌肉中的DIV1拷贝数远高于26±1°C。

三、得出结论

在测试的两种水温下,DIV1感染组和对照组之间的存活率和病毒载量存在显着差异。在这两个测试温度下,感染DIV1的虾的存活率在30 hpi时下降至 5%。这项研究表明,将南美白对虾转移到较高的水温中对DIV1感染造成的损害没有有益的影响。感染DIV1的南美白对虾在26±1℃下48小时内存活率下降至4.44%,在32±1℃下30小时内下降至2.22%。高水温养殖的南美白对虾病毒载量高,更容易感染DIV1。在32±1°C时,几乎所有组织都在第一感染阶段达到病毒载量阈值。

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