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CHO-K1 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆)

作者:泰澤生物
CHO-K1 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆)

細胞介紹

1957年,PuckTT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細胞,CHO-K1是CHO的一個亞克隆。CHO-K1的生長需要脯氨酸。

CHO-K1 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆)

基本資訊

細胞别稱:CHO cell clone K1;

CHO K1;CHOK1;GM15452

細胞來源:卵巢

細胞形态:上皮細胞樣

生長特性:貼壁生長

安全等級:BSL1

包裝規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

倍增時間:2~3天

傳代比例:1:3~1:4

保藏機構:ATCC;CCL-61;ATCC;CRL-9618

CCTCC;GDC0018;JCRB;IFO50414

培養儲存

培養體系:Ham's F-12K+10%FBS

培養條件:

氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃

凍存條件:

基礎培養基+10%DMSO +20%FBS,液氮儲存

傳代步驟

如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

  1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次;
  2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化;
  3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液後吹勻;
  4. 收到細胞後首次傳代推薦将細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,後續傳代根據實際情況按1:2到1:4的比例進行。

凍存步驟

  1. 細胞凍存時,棄去培養基後,PBS清洗一遍後加入1ml胰酶,細胞變圓脫落後,加入1ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數闆計數;
  2. 4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10(6)/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好辨別;
  3. 将凍存管置于程式降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以後轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細胞用途

僅供科研使用。

質檢結果

支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性。

注意事項

1.收到常溫細胞後,請檢查産品包裝狀況,若發現破損、溢出及污染,請及時聯系我們。

2.先不打開培養瓶蓋,用75%酒精處理培養瓶表面,如果是貼壁細胞, 請在培養箱中靜置2-3小時(根據細胞密度狀況決定)用來穩定細胞狀态。如果是懸浮細胞則不需要靜置,直接按照懸浮細胞步驟操作。

3.靜置完成後,在顯微鏡下确認細胞生長狀态并拍照記錄。(照片能有效幫助我們提供售後服務)

4.細胞培養過程中如有異常狀況,歡迎進行技術交流。

CHO-K1 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆)

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