動物源性食品中寄生蟲的檢測——片形吸蟲

片狀鼻吸主要見于牛羊等反刍動物的肝膽管，可引起較嚴重的寄生蟲病———肝片（又稱"肝蛞蝓"），偶爾可感染人類。以急慢性肝炎和膽管炎為特征，伴有全身性中毒和營養失調，危害相當嚴重。最普遍的是夏季和秋季，經常是局部流行，對幼畜造成嚴重傷害，死亡率高，給畜牧業生産造成了巨大的經濟損失。該病在世界各地廣泛傳播，牧區牲畜發病率高，牛、山羊、綿羊、馬、駱駝等感染率高。人們通過食用具有囊性囊性囊性的水生植物，咀嚼水草或飲用帶有囊性囊性囊性的河水來感染，主要用于分發。法國、聯合王國、古巴和其他國家報告了更多的病例。

1 病原體特征

在我國，花栗蟲主要是肝花栗蟲（fasciola hepatica）和大形吸盤（fasciola gigantica），屬于吸盤、片狀、片狀等成員。片狀吸盤成蟲是雌雄同源的，新鮮的蟲體棕紅色，後腹扁平。蝸牛肝鱗狀蠕蟲的大小（21~41）毫米×（9~14）毫米，像一片葉子的形狀，身體前端呈圓錐形突出，稱為頭錐形，頭錐後蝸杆體突然變寬，稱為肩峰。口吸盤小，位于昆蟲體的頂部，腹部吸盤稍大，位于頭錐的底部，口吸盤非常靠近腹吸盤，生殖孔位于口吸盤和腹吸盤之間。大尺寸吸蟲蟲體型（30~75）毫米×（5~12）毫米，像竹葉狀，蟲體肩部不明顯，背部鈍圈。大形吸盤卵較大，橢圓形，黃褐色，蛋薄，一端有蓋子。肝片吸盤卵的大小為（107至158）米×（70至100）sm，大形吸盤卵的大小為（150至190）sm×（70至90）sm。

片狀麻蟲寄生在肝膽管中，中間宿主是淡水蝸牛———椎體固體，肝片狀鼻吸蟲的主要中間宿主是小土巢蝸牛，還有蘿蔔蝸牛，大型吸蟲的主要中間宿主是耳蘿蔔蝸牛。成蟲被發現在動物肝髒的膽管中，産卵後用膽汁進入腸道，然後排洩糞便，如果生活在22~26°C的水中，9~14d可發育成毛毛蟲卵，并迅速鑽入錐體固體螺杆體，在螺杆體中由兩代細胞球菌和荴荽荽成尾部， 然後從螺絲中逸出，漂浮在水面下，當與動物（植物或腐爛的生物）接觸後尾部，形成囊性囊性囊性。在牛，羊和其他宿主以含有囊性囊性囊質的水生植物為食後，幼蟲在體内移動到肝髒鑽入膽管并發育成蟲。從感染到從糞便中發現卵的最短時間為10周，每個成年人每天可以産下約20，000個卵。成蟲可以在人體記憶體活長達12年。

2 流行病學特征

片狀吸蟲分布于世界各地，是中國分布最廣、危害最強的寄生蟲之一。我國各省均存在吸屑病，未采取防控措施地區牛羊感染率達90%以上，多為本地區地方性地方病。大面積吸蟲主要分布在熱帶和亞熱帶地區，多見于南方省份，如福建、廣東等。

溫度、水和淡水蝸牛是片狀鼻涕病流行的重要因素，當動物長時間停留在潮濕的小牧場上時，它們最容易受到嚴重感染。該病在雨季發生頻率更高，在幹旱年份較少發生。在自然條件下，新雨會刺激成熟尾巴的大量溢出，特别是在溫暖的季節和雨季長期幹旱和降雨，往往導緻爆發。牲畜和人與昆蟲不斷排洩大量禽蛋到外界，污染環境，成為疾病的感染源。該病主要影響牛、羊、駱駝、鹿、馬、豬也可感染，人偶爾可被感染。世界衛生組織估計，全世界有240萬人受到感染。中國已經報告了152例人類感染病例，其中許多是在肝髒和膽汁手術中發現的。在近期對人類寄生蟲病的調查中，甘肅、新疆、河南等10省人口糞便中檢出片狀血吸蟲卵，感染率為0.0006%~1%。是以，據推測，該國約有160，000人感染了片狀血吸蟲病。

流行地區的居民被患有囊性囊腫的水生植物的生食或被囊性囊性囊腫污染的飲用水感染，或被生牛，羊内髒，特别是肝髒中含有兒童蟲子的生食感染。肝屑形吸蟲中間體椎骨廣泛繁殖于沼澤、池塘、溝渠、水田等水體，羊、牛吃水生植物的機會很多，容易造成肝片狀吸蟲在羊群、牛群中廣泛流行。感染後，可以獲得一定程度的免疫力，這種免疫力主要來自未成熟的昆蟲代謝物的刺激，成蟲代謝物沒有作用。

3 危害

（1）對牲畜的危害 綿羊和山羊對片狀昆蟲最敏感，其次是牛。輕度感染通常不會出現症狀，當它們大量發生時，它們會表現出症狀。然而，幼年動物的輕度感染也會出現症狀，這種疾病對幼年動物特别有害，并可能導緻大規模死亡。臨床上分為急性和慢性類型。綿羊最常發生，死亡率高。牛多為慢性病，牦牛症狀明顯，成年牛症狀一般不明顯，如果感染嚴重，營養不良，也可能導緻死亡。

（2）人肝片狀血吸蟲病多為地方性地方病，在一定條件下，局部流行，遍及歐洲、非洲、美洲和大洋洲，共有51個國家，這些國家共報告患者7071例。中國共報告感染者和患者204例，分布在貴州、江西、湖北、内蒙古、陝西、山東、廣西、廣東和東北三省。

當人們感染片狀吸蟲時，它們表現出急性，慢性和異位損傷。

急性型：主要由兒童繭在腹腔和肝髒中的運動引起，如細菌感染的結合可導緻嚴重後果。這一時期的症狀不相同，主要是不規則發燒（38至40攝氏度），右下腹痛，食欲不振，腹脹，腹瀉或便秘。還可出現咳嗽、胸痛、右胸濕音和胸膜摩擦音。大多數有肝髒腫脹，少數伴有大脾髒和腹水。這些症狀可以在大約4個月的時間内消退，并逐漸進入慢性期。

慢性型：當急性症狀消退時，數月或數年内不會有明顯的不适，并且在此期間某些症狀可能會再次出現。如腹痛、腹瀉、不規則發熱及反複荨麻疹、黃疸、貧血、低純度蛋白血症、高免疫球蛋白血症等。後兩者是由于寄生蟲膽管上皮損傷、成人膽管糜爛和進食引起的成人膽管慢性發炎和增生引起的膽管纖維化緻肝硬化，成體或膽管結石的形成也可引起膽管梗阻引起的梗阻性黃疸，進而發展成膽汁肝硬化。

異位損傷：也稱為肝外骨骼病。兒童蠕蟲穿過腹腔或被血液攜帶到肝外的器官群組織，如腹壁肌肉，引起病變。中東個别地區的人都有吃生羊肝的習慣，寄生在羊肝膽管中可侵入人咽，引起局部水腫和充血，吞咽和呼吸困難，耳聾窒息，即咽肝片狀血吸蟲病。

4 國内外衛生要求

按照國家屠宰檢疫和無害化處理的有關規定，屠宰後發現寄生蟲損傷傷勢較輕時，部厘清除損害，其他部位可有條件使用，損害嚴重時，将整個器官移走化學化或銷毀。

5 檢測方法

可根據流行病學、臨床表現、實驗室檢查和驗屍結果作出全面判斷。糞便鏡像發現，卵子是确認片狀鼻涕疾病的基礎。實驗室診斷技術如下：

5.1 病原體檢查

通過病原體檢查，糞便中發現的卵子，十二指腸引流液，腹腔鏡組織檢查或組織學檢查是診斷疾病的基礎。

5.2 免疫學檢查

（1）抗原皮内反應試驗，選擇高稀釋度抗原進行皮内試驗。皮内試驗通常以成人鹽水冷浸為抗原（稀釋1：15000）進行，睾丸激素病與華氏的鑒别率為100%。

（2）抗體檢測采用間接紅細胞凝血試驗（IHAT）、ELISA、間接熒光抗體試驗（IFAT）、補體結合試驗、對流免疫電子學等方法具有較高的靈敏度。

5.3 分子生物學方法

一種特殊的PCR快速識别肝晶片形吸盤的類型，以肝晶粒吸盤的基因組DNA為模闆，以先前的盤吸盤、日本分裂吸盤等DNA為對照，用特異性引物ITS-1、ITS-2進行PCR擴增、電泳擴增和凝膠成像觀察，隻有嗜肝吸盤樣品出現特異性條帶， 此方法具有很強的特異性條帶。

吸食肝髒晶片的ITS-1序列的總長度為245 pb，ITS-2序列的全長為362 pb。肝片吸術的特異性引物itS-1：上遊引物為5'-CTCATTGAGGCATAGCAT-3'，下遊引物為5'-CAATGAAGAAGAATGAAG-3';昆蟲吸收ITS-2特異性引物：上遊引物為5'-ATATTGCGCCCATGGTTAG-3'，下遊引物為5'-CCAATGAAAGGAGG-3'。