使用井盐水培育单环刺螠苗种技术

使用井盐水培育单环刺猬幼苗的技术

单环刺猬，俗称海肠，是门内常见的蚜虫物种，广泛分布于中国、韩国、俄罗斯和日本，它是一种长圆柱形链接动物，全部无毛刺，淡黄色。单环刺猬富含蛋白质、氨基酸和微量元素，具有良好的营养健康价值。成年个体体型较大，长100~300毫米，宽25~27毫米，体面覆盖着大小不一的颗粒状突起，吻锥形水温可以存活，在8~26°C的条件下生长较好，盐度范围为15~36，耐受pH范围为4.5~9.5， pH值为7.5~8.5，溶氧高于1.14mg/升的条件可以正常生活，低溶性氧耐久性强，溶解氧0.34~0.45mg/升可耐受46小时以上。主要生境是潮间带和潮下带，单环刺猬生活在U形洞穴中，通过过滤掉海水中的悬浮物质来觅食。在中国、韩国和日本，它被认为是高端海鲜，其高营养和经济价值使其成为重要的水产养殖资源。

由于近年来单环刺猬的过度捕捞，其自然资源受到严重破坏，迫切需要开展人工育种以满足人们的需求，但目前我国单环刺猬育种技术发展还不够成熟，无论是幼苗孵化还是成种育种都处于探索阶段 有报道称，单环刺猬年有两个繁殖期： 春季（4月中下旬至5月底）的大生殖期和秋季（9月）的小生殖期，在此期间，雌性的肾管充满卵细胞和橙色雄性的精子填充的肾管呈乳白色。平均而言，雌性有超过100万个卵。本试验利用盘锦丰富的井盐水，对单环刺猬的苗种栽培进行了研究，以期利用盘锦丰富的井盐水资源，为单环刺猬种子生产的产业化提供一种新的思路。

一、单环刺猬人工幼苗制备

1. 物种

种子的规格和质量直接关系到卵子收获和受精的实施效果，直接影响幼虫的发育，因此必须选择好的种子。根据苗木要求，从辽宁大连海和河北天然海地区选择品种进行生长，鲜重在100~250克，可长达3年的个体。根据幼苗的需要，从4月下旬开始收集幼苗。种子装在直接保温箱中，箱内装500毫升冰瓶两个，播种占保温箱高度的2/3，袋口紧紧，装入发泡箱中并运至盘锦广河螃蟹实业有限公司临时养殖池进行临时处理。

2. 临时维护

重100~200克的物种的临时投饲密度为15~20/m2，重量为200~250克的1 0~12/m2，水温控制在（20±0.5）C，盐度（30±2），pH值（8±0.2）。种子运输到临时池中第一天不能喂饵，然后每天喂小球藻膏，按照（20~40）×10次4/ml喂养，早晚各喂食1次，也可按2%的重量使用该化合物进行饲喂。每天中午换水1次，换水100%，在换水过程中虹吸底部粪便。在临时维修期间，应及时将受伤的身体表溃烂的死者捞出，以免破坏水质。

3. 井盐水的处理

将辽宁省盘锦广和螃蟹有限公司研发中心某地下盐水井的水泵入沉淀池进行自然降水，井盐水在使用前泵入储备池，采用100~120mg/L漂白消毒处理，当沉淀完毕后， 余氯消失后，利用EM菌调节水质，通过两个砂滤器排入生物处理池处理，当氨氮、亚硝酸盐、碱度等指标达到标准时，养殖用水即可在苗圃使用。

幼苗盐度控制在27~30°C，水温16~23°C，pH值8.0~8.4°苗圃消毒一般采用100毫克/升漂白剂浸泡，消毒处理7天后，用清水冲洗干净排水，使用盐酸和过氧化氢水对幼苗水进行进一步消毒和清洗。

施肥和孵化

1. 授精

本实验采用人工解剖学采集精子卵子的方法，用剪刀切下单环刺嘴，用手挤压，将精子、卵腺管挤出，单独收集到容器中，等待备份（这样通过丰满的性腺图就可以很好地单独存放性腺体），手术时间适宜在30分钟。精子卵子可以在幼苗计划下集中收获。人工解剖学可以有效控制精子量，不会引起过多的精子畸形。一般来说，100个充满女性卵子的性腺只需要1个性腺完整的男性精子来匹配。

在收集鸡蛋之前，准备一个200升的塑料方形槽，在正方形中放入200升经过处理的盐水。根据密度200~300/ml，将收集到的卵子缓慢倒入受精池中，微量氧合，将精液缓慢加入受精池中，搅拌均匀，并同步镜面检查，观察卵子周围10~15个精子，停止精液。每2至3分钟搅拌一次，受精膜被掀起后10分钟，卵核消失。第一个极点在1小时后出现，第二个极点在大约1.5小时后出现。受精胚胎在膜中发育，受精膜被掀起后，受精卵均匀地扩散到孵化场进行孵化。孵化场的密度为4至5毫升。一般采用这种方法受精率可达到90%以上，该方法简单易控。

2. 孵化

胚胎发育分为以下四个阶段。

受精卵：单环带刺，卵子受精，卵子受精膜表面，受精膜与卵膜形成清晰的卵周围腔，卵的核心消失，周围腔体出现放射性结构，其次是第一极和第二极。

排卵期：单环骨裂是排卵等裂缝的全裂。排卵在受精后1.5至2小时开始，经过2或4个细胞阶段。3.2~3.8小时进行第三次排卵，为明显的螺旋排卵。形成8个分裂球，排列成两层，上下分裂球几乎相等大，4.5~4.7小时形成32个细胞阶段，分裂间隙仍然清晰可见。排卵继续，分叉球变得越来越小，并逐渐模糊进入多细胞阶段。

胚泡期：受精后7.2~8.1小时进入胚泡期，单环刺猬胚为空腔胚胚。囊胚壁由几乎相等的分裂球组成。

原代肠胚期：受精后10~13小时至原肠胚阶段，原肠形成过程以单极结合外判的形式，植物极半球内化，导致植物极端半球细胞群困住到内层。15至18小时，胚胎开始在膜中旋转。施肥20~24小时后破膜进入单轮幼虫前期幼虫。

三、幼虫期管理

幼虫的发育经历3个阶段，即幼虫期，幼虫期，蠕虫期。

担架幼虫：担架幼虫期间的幼虫呈梨形，上半球脑板顶部有一束纤毛，下半球后部肛门周围有纤毛轮。幼虫的消化道尚未成形，体内充满了油滴。在这一点上，有寻求光明。受精48小时后，幼虫形成弓形虫肠管。嘴巴位于剪切轮下方，肛门位于下半球的后部。顶部纤毛束消失。上半球的前部区域和下半球肛门周围的身体被短纤毛轮密集覆盖。水温在18~22°C时，肩部幼虫经过16~18天的发育，到担架幼虫的下腹部后部出现一对腹部棘轮，前部有纤毛轮。

体剖幼虫：肩部下半部幼虫迅速变长，并出现分段现象，发育成虫幼虫，最后将较长的下半部分球状形成12个体段，前毛轮消失，消化道变细，体腔球出现在体腔内。身体部分在水中缓慢伸长，仍然漂浮。

蠕虫期：受精后25~30天，幼虫从浮游生物到底栖生活。上半球开始恶化变小，嘴纤毛轮消失，下半球继续伸长，身体部分消失在身体干部中。不久，体表纤毛的退化消失，体腔增大，消化道变长，卷曲在体腔内。直肠基部的两侧出现一对管状囊，直肠基部为亚沙质。

幼虫期：受精后40~50天，前段的蠕虫状幼虫发育成半管状接吻部分，身体后端肛门周围有11圈尾毛。幼虫体长为5~6毫米，能在水下快速下潜，形成U形隧道。从观察来看，除了腺体不成熟，在形态和生态上都与cheng相似，这就是年轻人。

1. 密度

幼虫以1/ml的密度繁殖。孵化后，担架幼虫可以通过虹吸和笼收集收集，并且可以根据密度对幼苗进行布料。幼虫的密度控制在0.5ml。蜗杆周期密度控制在0.2~0.3/m2，视实际情况而定。

2. 诱饵

在担架幼虫期和体效期的饵料可以单鞭金藻、小球藻为主，辅助饵料也可以使用海洋红曲菌。蜗杆预用单一藻类，中后期可使用交配材料，喂食后注意使用300目过滤。预喂料按（2~4）×10 4/ml，中期投饲（4~8）×10 4/ml，晚饲喂（8~14）×10 4/ml，视水中浮游植物的量而定。每天投喂两次，早晚各一次，在虫害期前协调物料0.2~0.5g/m3，后期协调物料5~6g/m3，根据进食情况增加或减少。残留诱饵的数量可以通过触底过程和观察肠道的丰满度来确定。

3. 水质管理

担架幼虫期，体段采用预补液，充水后加水水位换水的方法，每日补水10~15厘米，全水位后每天改变20~30厘米，补液后采用EDTA、抗应激药物、微生态制剂。也可3~4天补水1次，每次补水20%~30%，到满水位后不换水，每1天使用微生态制剂，换水前换水时使用300眼屏进行引流。

每天照镜子观察幼苗的活力，观察鞭打行力和体壁损伤，以防止幼苗过多地集中在池面上。可每天早晚誄打1次，上下搅拌1次，使幼虫均匀分布，以利于幼虫的正常生长。

虫期可每5~7天换水一次，每2天用微生态制剂稳定水质。每次换水约30%，视水质变化而定。

4.附加基本处理和交货时间

粘合基材的选择和处理：本实验中使用的粘合基体为细砂，细砂粒径大于0.5毫米。使用前40眼筛下砂渣，在体部进行消毒处理，一般采用高锰酸钾浸泡48小时，反复清洗直至水质能投入使用。

附着基期：在单环刺猬幼苗附着的基体投产时间特别重要，交货时间较晚，体段期进入底部运动期，沙子容易压在幼苗底部导致桩死。最佳输送粘附基数时间在4~5天后出现12个身体部位后，也可以观察到，当上半球开始恶化变小时，口纤毛轮即将消失，下半球继续伸长，身体部位消失在身体干部中的最佳时间。砂的厚度可在1~2毫米内铺展，将沙子均匀倒入池中，采用自沉法，在溅砂前先停止充氧，使幼苗漂浮后再运行。

5. 敌人防御

主要敌人是脚类，特别是大量细高跟鞋繁殖经常侵犯单环刺猬虫期，敌方伤害防御可以使用0.3毫克/升的"特殊杀1号"（表面渗透剂），经过12小时的药物变化20%~30%，24小时时使用微生态制剂进行水调节。使用300个眼睛和棉网袋减少了猛犸跳蚤进入苗圃。近年来，由于大量使用杀虫药，有些足类，即一些水蚤已经产生了强烈的抗药性，难以杀灭，应引起高度重视。

四、苗圃出水池

当蠕虫繁殖期20~30天达到5毫米左右时，60，000~80，000只/kg可出池。使用100目筛在污水出口收集幼苗和沙子，然后使用30至40目筛子筛过沙子并收集幼苗。一般产量在0.5~0.6公斤/平方米。