使用井鹽水培育單環刺螠苗種技術

使用井鹽水培育單環刺猬幼苗的技術

單環刺猬，俗稱海腸，是門内常見的蚜蟲物種，廣泛分布于中國、南韓、俄羅斯和日本，它是一種長圓柱形連結動物，全部無毛刺，淡黃色。單環刺猬富含蛋白質、氨基酸和微量元素，具有良好的營養健康價值。成年個體體型較大，長100~300毫米，寬25~27毫米，體面覆寫着大小不一的顆粒狀突起，吻錐形水溫可以存活，在8~26°C的條件下生長較好，鹽度範圍為15~36，耐受pH範圍為4.5~9.5， pH值為7.5~8.5，溶氧高于1.14mg/升的條件可以正常生活，低溶性氧耐久性強，溶解氧0.34~0.45mg/升可耐受46小時以上。主要生境是潮間帶和潮下帶，單環刺猬生活在U形洞穴中，通過過濾掉海水中的懸浮物質來覓食。在中國、南韓和日本，它被認為是高端海鮮，其高營養和經濟價值使其成為重要的水産養殖資源。

由于近年來單環刺猬的過度捕撈，其自然資源受到嚴重破壞，迫切需要開展人工育種以滿足人們的需求，但目前我國單環刺猬育種技術發展還不夠成熟，無論是幼苗孵化還是成種育種都處于探索階段 有報道稱，單環刺猬年有兩個繁殖期： 春季（4月中下旬至5月底）的大生殖期和秋季（9月）的小生殖期，在此期間，雌性的腎管充滿卵細胞和橙色雄性的精子填充的腎管呈乳白色。平均而言，雌性有超過100萬個卵。本試驗利用盤錦豐富的井鹽水，對單環刺猬的苗種栽培進行了研究，以期利用盤錦豐富的井鹽水資源，為單環刺猬種子生産的産業化提供一種新的思路。

一、單環刺猬人工幼苗制備

1. 物種

種子的規格和品質直接關系到卵子收獲和受精的實施效果，直接影響幼蟲的發育，是以必須選擇好的種子。根據苗木要求，從遼甯大連海和河北天然海地區選擇品種進行生長，鮮重在100~250克，可長達3年的個體。根據幼苗的需要，從4月下旬開始收集幼苗。種子裝在直接保溫箱中，箱内裝500毫升冰瓶兩個，播種占保溫箱高度的2/3，袋口緊緊，裝入發泡箱中并運至盤錦廣河螃蟹實業有限公司臨時養殖池進行臨時處理。

2. 臨時維護

重100~200克的物種的臨時投飼密度為15~20/m2，重量為200~250克的1 0~12/m2，水溫控制在（20±0.5）C，鹽度（30±2），pH值（8±0.2）。種子運輸到臨時池中第一天不能喂餌，然後每天喂小球藻膏，按照（20~40）×10次4/ml喂養，早晚各喂食1次，也可按2%的重量使用該化合物進行飼喂。每天中午換水1次，換水100%，在換水過程中虹吸底部糞便。在臨時維修期間，應及時将受傷的身體表潰爛的死者撈出，以免破壞水質。

3. 井鹽水的處理

将遼甯省盤錦廣和螃蟹有限公司研發中心某地下鹽水井的水泵入沉澱池進行自然降水，井鹽水在使用前泵入儲備池，采用100~120mg/L漂白消毒處理，當沉澱完畢後， 餘氯消失後，利用EM菌調節水質，通過兩個砂濾器排入生物處理池處理，當氨氮、亞硝酸鹽、堿度等名額達到标準時，養殖用水即可在苗圃使用。

幼苗鹽度控制在27~30°C，水溫16~23°C，pH值8.0~8.4°苗圃消毒一般采用100毫克/升漂白劑浸泡，消毒處理7天後，用清水沖洗幹淨排水，使用鹽酸和過氧化氫水對幼苗水進行進一步消毒和清洗。

施肥和孵化

1. 授精

本實驗采用人工解剖學采集精子卵子的方法，用剪刀切下單環刺嘴，用手擠壓，将精子、卵腺管擠出，單獨收集到容器中，等待備份（這樣通過豐滿的性腺圖就可以很好地單獨存放性腺體），手術時間适宜在30分鐘。精子卵子可以在幼苗計劃下集中收獲。人工解剖學可以有效控制精子量，不會引起過多的精子畸形。一般來說，100個充滿女性卵子的性腺隻需要1個性腺完整的男性精子來比對。

在收集雞蛋之前，準備一個200升的塑膠方形槽，在正方形中放入200升經過處理的鹽水。根據密度200~300/ml，将收集到的卵子緩慢倒入受精池中，微量氧合，将精液緩慢加入受精池中，攪拌均勻，并同步鏡面檢查，觀察卵子周圍10~15個精子，停止精液。每2至3分鐘攪拌一次，受精膜被掀起後10分鐘，卵核消失。第一個極點在1小時後出現，第二個極點在大約1.5小時後出現。受精胚胎在膜中發育，受精膜被掀起後，受精卵均勻地擴散到孵化場進行孵化。孵化場的密度為4至5毫升。一般采用這種方法受精率可達到90%以上，該方法簡單易控。

2. 孵化

胚胎發育分為以下四個階段。

受精卵：單環帶刺，卵子受精，卵子受精膜表面，受精膜與卵膜形成清晰的卵周圍腔，卵的核心消失，周圍腔體出現放射性結構，其次是第一極和第二極。

排卵期：單環骨裂是排卵等裂縫的全裂。排卵在受精後1.5至2小時開始，經過2或4個細胞階段。3.2~3.8小時進行第三次排卵，為明顯的螺旋排卵。形成8個分裂球，排列成兩層，上下分裂球幾乎相等大，4.5~4.7小時形成32個細胞階段，分裂間隙仍然清晰可見。排卵繼續，分叉球變得越來越小，并逐漸模糊進入多細胞階段。

胚泡期：受精後7.2~8.1小時進入胚泡期，單環刺猬胚為空腔胚胚。囊胚壁由幾乎相等的分裂球組成。

原代腸胚期：受精後10~13小時至原腸胚階段，原腸形成過程以單極結合外判的形式，植物極半球内化，導緻植物極端半球細胞群困住到内層。15至18小時，胚胎開始在膜中旋轉。施肥20~24小時後破膜進入單輪幼蟲前期幼蟲。

三、幼蟲期管理

幼蟲的發育經曆3個階段，即幼蟲期，幼蟲期，蠕蟲期。

擔架幼蟲：擔架幼蟲期間的幼蟲呈梨形，上半球腦闆頂部有一束纖毛，下半球後部肛門周圍有纖毛輪。幼蟲的消化道尚未成形，體内充滿了油滴。在這一點上，有尋求光明。受精48小時後，幼蟲形成弓形蟲腸管。嘴巴位于剪切輪下方，肛門位于下半球的後部。頂部纖毛束消失。上半球的前部區域和下半球肛門周圍的身體被短纖毛輪密集覆寫。水溫在18~22°C時，肩部幼蟲經過16~18天的發育，到擔架幼蟲的下腹部後部出現一對腹部棘輪，前部有纖毛輪。

體剖幼蟲：肩部下半部幼蟲迅速變長，并出現分段現象，發育成蟲幼蟲，最後将較長的下半部分球狀形成12個體段，前毛輪消失，消化道變細，體腔球出現在體腔内。身體部分在水中緩慢伸長，仍然漂浮。

蠕蟲期：受精後25~30天，幼蟲從浮遊生物到底栖生活。上半球開始惡化變小，嘴纖毛輪消失，下半球繼續伸長，身體部分消失在身體幹部中。不久，體表纖毛的退化消失，體腔增大，消化道變長，卷曲在體腔内。直腸基部的兩側出現一對管狀囊，直腸基部為亞沙質。

幼蟲期：受精後40~50天，前段的蠕蟲狀幼蟲發育成半管狀接吻部分，身體後端肛門周圍有11圈尾毛。幼蟲體長為5~6毫米，能在水下快速下潛，形成U形隧道。從觀察來看，除了腺體不成熟，在形态和生态上都與cheng相似，這就是年輕人。

1. 密度

幼蟲以1/ml的密度繁殖。孵化後，擔架幼蟲可以通過虹吸和籠收集收集，并且可以根據密度對幼苗進行布料。幼蟲的密度控制在0.5ml。蝸杆周期密度控制在0.2~0.3/m2，視實際情況而定。

2. 誘餌

在擔架幼蟲期和體效期的餌料可以單鞭金藻、小球藻為主，輔助餌料也可以使用海洋紅曲菌。蝸杆預用單一藻類，中後期可使用交配材料，喂食後注意使用300目過濾。預喂料按（2~4）×10 4/ml，中期投飼（4~8）×10 4/ml，晚飼喂（8~14）×10 4/ml，視水中浮遊植物的量而定。每天投喂兩次，早晚各一次，在蟲害期前協調物料0.2~0.5g/m3，後期協調物料5~6g/m3，根據進食情況增加或減少。殘留誘餌的數量可以通過觸底過程和觀察腸道的豐滿度來确定。

3. 水質管理

擔架幼蟲期，體段采用預補液，充水後加水水位換水的方法，每日補水10~15厘米，全水位後每天改變20~30厘米，補液後采用EDTA、抗應激藥物、微生态制劑。也可3~4天補水1次，每次補水20%~30%，到滿水位後不換水，每1天使用微生态制劑，換水前換水時使用300眼屏進行引流。

每天照鏡子觀察幼苗的活力，觀察鞭打行力和體壁損傷，以防止幼苗過多地集中在池面上。可每天早晚誄打1次，上下攪拌1次，使幼蟲均勻分布，以利于幼蟲的正常生長。

蟲期可每5~7天換水一次，每2天用微生态制劑穩定水質。每次換水約30%，視水質變化而定。

4.附加基本處理和交貨時間

粘合基材的選擇和處理：本實驗中使用的粘合基體為細砂，細砂粒徑大于0.5毫米。使用前40眼篩下砂渣，在體部進行消毒處理，一般采用高錳酸鉀浸泡48小時，反複清洗直至水質能投入使用。

附着基期：在單環刺猬幼苗附着的基體投産時間特别重要，交貨時間較晚，體段期進入底部運動期，沙子容易壓在幼苗底部導緻樁死。最佳輸送粘附基數時間在4~5天後出現12個身體部位後，也可以觀察到，當上半球開始惡化變小時，口纖毛輪即将消失，下半球繼續伸長，身體部位消失在身體幹部中的最佳時間。砂的厚度可在1~2毫米内鋪展，将沙子均勻倒入池中，采用自沉法，在濺砂前先停止充氧，使幼苗漂浮後再運作。

5. 敵人防禦

主要敵人是腳類，特别是大量細高跟鞋繁殖經常侵犯單環刺猬蟲期，敵方傷害防禦可以使用0.3毫克/升的"特殊殺1号"（表面滲透劑），經過12小時的藥物變化20%~30%，24小時時使用微生态制劑進行水調節。使用300個眼睛和棉網袋減少了猛犸跳蚤進入苗圃。近年來，由于大量使用殺蟲藥，有些足類，即一些水蚤已經産生了強烈的抗藥性，難以殺滅，應引起高度重視。

四、苗圃出水池

當蠕蟲繁殖期20~30天達到5毫米左右時，60，000~80，000隻/kg可出池。使用100目篩在污水出口收集幼苗和沙子，然後使用30至40目篩子篩過沙子并收集幼苗。一般産量在0.5~0.6公斤/平方米。