高效鑒别日本沼蝦氨基脲來源的主成方法
試驗分析了不同時間不同藥物濃度養殖的日本沼蝦不同組織氨基脲含量變化以及氨基脲比例，同時分析了不同藥物濃度養殖的日本沼蝦不同組織的藥物代謝。不同組織氨基脲含量變化整體上呈現下降的趨勢，随時間的遞增氨基脲含量不斷下降。日本沼蝦在用藥初期和末期氨基脲含量比例出現很大的變化，用藥末期不同給藥組和空白組氨基脲含量比例趨于相近。藥物代謝動力學分析結果表明氨基脲在肝胰腺組織中消除最快，在甲殼組織中消除最慢。各組織中吸收半衰期分别是肝胰腺組織中最短，甲殼組織最長。在養殖停藥的初期，空白組和給藥組蝦肌肉組織中氨基脲含量最高，在藥物代謝後期，由于空白組和給藥組日本沼蝦肌肉組織中SEM含量趨于相近，難以區分内源和外源性氨基脲。
已有研究證明氨基脲來源廣泛，既有呋喃西林的代謝産物，也有内源性氨基脲。當存在内源性氨基脲時，會出現幹擾呋喃西林藥物代謝物檢測的假陽性的問題。是以為了減少誤判情況的發生，需要探索其它可行的外源性和内源性氨基脲的判定方法。試驗通過快速蒸發電離高分辨質譜法測定飼喂呋喃西林後的日本沼蝦肌肉組織組成成分輪廓特征的變化，據輪廓特征進行主成分分析，然後進行LiveID模組化，用S-plot圖分析資料是否具有鑒别價值，再進行質譜分析尋找可能作為特征的組成物質，同時對空白組進行分析，實作對日本沼蝦是否飼喂呋喃西林進行鑒别。
分别以10mg/kg·bw和30mg/kg·bw的劑量稱取藥物和配合飼料，将藥物用适量水溶解并均勻噴灑到飼料表面，期間不停攪拌保證均勻，自然晾幹。将蛋清加适量水攪拌制成粘合劑，噴灑到飼料表面，自然晾幹。飼料表面光滑發亮，蛋清包裹較好，冷凍儲存，備用。
沼蝦幼蝦随機分為三組，1個空白組和2個給藥組，每個養殖池放苗量為12.5kg。用無藥飼料暫養一周。然後2個給藥組分别投藥物濃度10mg/kg·bw和30mg/kg·bw的飼料，連續投喂5d，停止投喂藥物飼料，改喂不含藥物的飼料。空白組投喂不含藥物的飼料，其餘條件均與給藥組一緻。每日8時至9時和17時至18時各投喂1次飼料，觀察攝食率大于95%，養殖試驗周期為31d。
日本沼蝦連續投喂含呋喃西林飼料喂養5d後，分别于停藥後1d，2d，4d，8d，12d，16d，20d，24d，31d采樣日本沼蝦樣品，每次随機采集30尾，采集的日本沼蝦快速放入液氮罐，并迅速轉移到實驗室。将整蝦置于室溫解凍，割開甲殼，取肌肉供測試。采用iKnife切割肌肉樣品，切口深度約為0.3～0.5cm，切割長度5～8cm，持續時間2～3s，電壓設為30～50V，切割産生的氣體通過管路直接導入飛行時間質譜儀中。重複采集資訊9～10次，采集時保證總離子流圖信号峰間隔3～4s。
樣品解凍後，将蝦去殼後用iknife采樣，帶有高頻電流的手持式iknife切入樣品表面，瞬時産生資訊豐富的蒸汽進入iknife内部，通過傳輸管線和Venturi裝置的輔助達到質譜接口，沿傳輸毛細管到達加熱的Impactor表面，發生電離，進入質譜。停藥後的第2d和第4d，給藥組和空白組成分有顯著差別，随着養殖時間延長，主成分分析以及LiveID結果都表明給藥組成分逐漸與空白組重合，通過OPLS-DA，S-plot等多元統計分析工具對資料做進一步分析，可以在停藥初期差別使用和非使用呋喃西林的日本沼蝦。
主成分分析可以将結果進行可視化，更好的找差異性的物質。試驗将給藥組和空白組分别進行主成分分析，觀察給藥組和空白組的變化，尋找方法的可行性。試驗将27份樣品進行處理後檢測得到結果，在養殖試驗停止喂藥初期的第2d和第4d，10mg/kg·bw和30mg/kg·bw給藥組與空白組主成分均有部分重合，同時也存在不同的成分；随養殖代謝時間延長，主成分差異逐漸減小。在藥物代謝試驗中，停藥初期給藥組日本沼蝦肌肉組織中氨基脲含量比空白組日本沼蝦肌肉組織氨基脲含量顯著增大，差異顯著，主成分分析結果與日本沼蝦肌肉組織氨基脲含量結果變化一緻。
