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常見微生物培養基原材料—蛋白胨

作者:青島海博生物

蛋白胨是微生物培養基最常用的原材料之一。主要供給微生物需要的氮源、氨基酸等。其主要特點為:

1、易溶于水;

2、可被微生物直接利用,用于生長繁殖,不受高溫高熱影響而凝固。

3、是一種兩性電解質,具有緩沖作用。

蛋白胨從來源上可分為動物性蛋白胨、植物性蛋白胨、微生物蛋白胨。胰胨肉胨骨胨等都是動物性蛋白胨;而大豆蛋白胨等是植物性蛋白胨;酵母蛋白胨屬于微生物蛋白胨。

在微生物培養基中常用的蛋白胨有:

一、肉蛋白胨

1、肉蛋白胨(胃酶消化)

胃酶消化動物組織所得的蛋白胨,英文名稱為Peptic Digest of Animal Tissue,含有蛋白分子較大的䏡和胨,具有顯著的雙縮脲反應。另外,含有少量的低級多肽類和遊離類氨基酸。目前培養基中常用蛋白胨為牛骨蛋白胨,也有牛肉蛋白胨,後者營養成分明顯高于前者。

2、肉蛋白胨(胰酶消化)

胰酶消化動物組織所得的蛋白胨,英文名稱為Pancreatic Digest ofAnimal Tissue,富含低級多肽類和遊離氨基酸。胰酶消化肉的蛋白胨營養強于胃酶消化肉的蛋白胨。(國内常稱此類蛋白胨為胰蛋白胨)

3、明膠蛋白胨

明膠為從動物骨膠原而來的一種大分子蛋白質,通過胰酶消化動物明膠所得的蛋白胨即為明膠胨,英文名稱為Pancreatic Digest of Gelatin,胱氨酸和色氨酸含量低,甘氨酸和脯氨酸含量高,且幾乎不含有可發酵的碳水化合物,營養較低。比較适用于為糖醇發酵中提供氮源和制備低營養培養基。

4、䏡蛋白胨

混合酶消化動物組織蛋白,英文名稱為Proteose Peptone,營養豐富,含有大量高分子品質多肽、遊離氨基酸和生長促進因子,适用于細菌産毒素培養和營養要求苛刻的微生物培養。

注:“䏡”的水解程度要低于“胨”,蛋白質水解程度較低通常稱為“䏡”,蛋白質水解程度高通常稱為“胨”,“胨”繼續水解得到的是分子量更小的多肽或氨基酸。

5、胰蛋白䏡

胰酶消化動物組織蛋白質和植物蛋白質所得的蛋白胨,英文名稱為Trptose,營養豐富,可用于培養極難培養的微生物,如布魯氏菌和鍊球菌等,推薦用于血瓊脂基礎上進行溶血反應。

6、多價蛋白胨

由肉蛋白胨和酪蛋白胨混合而成,富含大量氨基酸,少量動物蛋白胨多肽盒大量酪蛋白胨多肽,營養更為豐富全面,适用于大多數細菌的生長繁殖。

二、酪蛋白胨以及乳清蛋白胨

1、酪蛋白胨

酪蛋白又稱幹酪素,是從牛奶中提取的一種營養價值很高的磷蛋白,是生産蛋白胨常用的原料。其氨基酸比較齊全,特别是色氨酸的含量比較高。是以,它在細菌生化試驗中最适宜用做靛基質和糖發酵試驗。但它缺乏胱氨酸、蛋氨酸等含硫氨基酸,故不适宜做硫化氫試驗。

注:酪蛋白主要存在于哺乳動物的肌肉和奶中,可以以此為原料大規模生産,是以我們配制培養基使用的酪蛋白胨不外乎來源于肉或奶。國外的酪蛋白胨是用胰酶消化牛奶中提取的酪蛋白制成,營養程度高,顔色淺,是以也被稱為“胰酪蛋白胨”或“胰蛋白胨”,而國内的酪蛋白胨則使用胰酶消化牛肉牛骨制成,顔色較深,也可以稱為“胰酪蛋白胨”或“胰蛋白胨”,本質上是一種肉蛋白胨。為了區分這兩種不同來源的酪蛋白胨,通常我們所說的“酪蛋白胨”“酪胨”是指用胰酶消化酪蛋白得到的蛋白胨,而“胰蛋白胨”則通常指的是用胰酶消化牛肉牛骨得到的蛋白胨。

2、酸水解酪蛋白

酸水解酪蛋白是酪蛋白經酸水解而成,含有大量氨基酸,而裡面的維生素成分幾乎被完全破壞,營養程度低,是以常用于維生素測定類培養基的制備,也适用于敏感培養基的配制及耐鹽菌的生長,應用于細菌抗藥性研究診斷培養基。由于含鐵量低,可用于疫苗生産上的毒素表達。适宜白喉菌、百日咳軍菌、鍊球菌的毒素和鍊黴菌的生長及做藥敏試驗的材料。

3、乳清蛋白胨

乳清蛋白胨是以乳清蛋白為原料,通過酶水解、過濾、濃縮、幹燥得到的一種蛋白胨。乳清蛋白是生産幹酪和幹酪素的副産物。乳清蛋白中含氮量較高,富含二十多種氨基酸,是以乳蛋白水解物中的氨基酸種類和氮源十分豐富。乳清蛋白胨多用于需要高溶解性氨基酸和肽源的應用,在發酵、實驗室培養基群組織培養方面尤其有用,對保加利亞乳杆菌、嗜熱鍊球菌、植物乳杆菌、幹酪乳杆菌以及雙歧杆菌的培養效果尤為突出。

4、䏡蛋白胨

䏡蛋白胨,又稱朊間質蛋白胨,又叫蛋白阮,與普通蛋白胨的差別是含有1%-2%的能被硫酸氨所沉澱的朊氮,是一種特殊的高營養的蛋白胨,富含高分子量的肽,在培養基中用于細菌毒素的檢測,可用于培養極難培養的微生物,尤其是需要快速培養時,推薦用于血瓊脂基礎上進行溶血反應。

䏡蛋白胨最初用于白喉毒素的生産,經改良後用于培養奈瑟氏球菌的巧克力瓊脂,以及在白喉杆菌生産中配制巧克力亞碲酸鹽瓊脂,為苛養微生物提供較好的營養物質。能用于培養鍊球菌、葡萄球菌、淋球菌以及其他需要豐富營養微生物,對低内毒素細菌的培養具有提高産量的效果。

三、非動物源性蛋白胨

1、大豆蛋白胨

大豆蛋白胨是由大豆蛋白質經酶水解消化後形成的䏡、胨、肽和氨基酸組成的一種水溶性混合物,是目前支援微生物生長不可替代的主要營養成分,廣泛應用于生物技術、制藥、動物和人類疫苗生産以及利用微生物淨化有毒有害物質和受污染水域處理等領域,大量應用于微生物發酵、工業研究、品質管理與控制和環境監測等行業。

2、其他蛋白胨

非動物源性蛋白胨還包括蔬菜蛋白胨、馬鈴薯蛋白胨、蠶豆蛋白胨、小麥蛋白胨等。

注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。