上一集探秘黑胶虫(上),我们主要讨论了部分黑胶虫样本鉴定为细菌这一情况,此外,还有一部分黑胶虫样本鉴定为支原体。这里举两个典型黑胶虫鉴定结果给大家分享:
图1 固体培养基上的猪鼻支原体集落
鉴定结果:样本7,12,18鉴定为 Mycoplasma hyorhinis(猪鼻支原体)
大小:0.15-0.3um
感染宿主:其感染猪的上呼吸系统的上皮细胞,通过口鼻途径传播。小猪可以被母猪或它们的同伴(无症状携带者)感染。
污染细胞途径:推测胰蛋白酶主要是从猪的胰脏提取,纯化获得的结晶,再制成的冻干制剂,过滤除菌不当的胰酶溶液可能携带猪鼻支原体,建议大家买知名品牌胰酶,降低污染风险。
图2 固体培养基上的牛支原体集落
鉴定结果:样本23鉴定为 Mycoplasma bovis(牛支原体);
大小:0.15-0.3um
感染宿主:主要寄生于牛体内,感染部位广泛,感染牛的呼吸道,会引起肺炎、中耳炎、关节炎、结膜炎。
污染细胞途径:细胞增殖的主要营养之一就是胎牛血清。胎牛血清来源于动物,其主要通过0.1um滤膜过滤除菌。如果血源及过滤除菌不当,就会给细胞带来潜在的支原体污染,因此建议大家购买知名品牌的胎牛血清。
接下来我们分析一下,上集中我们介绍了常见的黑胶虫污染特征有活跃游动,旋转梭动,原地颤动,这三种最常见的污染现象。支原体不像细菌,没有可用于游动的鞭毛,显然不太可能是活跃游动或旋转梭动两种现象。被鉴定为支原体污染的样本,极有可能是这种情况的黑胶虫样本—我们看到的黑胶虫在液体中原地颤动。并且支原体是目前已知的最小的原核生物,要在电子显微镜下才能观察,我们能看到原地颤动的黑点极有可能是支原体集落。
首先,我们可以先看几组可能被大家误认为是“黑胶虫”的原地颤动视频:
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视频1 小黑点原地颤动(L02肝细胞株被黑胶虫污染视频)
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视频2 小黑点原地颤动
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视频3 小黑点原地颤动
从这些“黑胶虫”污染视频中,我们可以总结出黑胶虫形态特征:
几乎都呈黑色椭圆点,有大有小;游离于细胞外,颤颤巍巍,仔细观察,能发现它在原地颤动。
此外,我们在帮客户分析细胞污染中,也发现俗说的“黑胶虫”污染真是“别有洞天”。下面是我们的聊天分析截图:
图3 客户聊天截图中的细胞图片
把这个图片放大如下:
图4 图中红圈中的黑点极有可能为支原体集落
接下来为了进一步确认,又让客户发了视频:
图5 客户聊天截图中的细胞视频
咱们把视频放大观察:
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视频6 小黑点原地颤动
通过视频我们可以看出很多椭圆形的小黑点在原地颤动。先前,在我们细胞交流群里就问过客户是否做过支原体检测,客户说做过,确定是支原体污染。在与客户的单独对话框里,我又进一步和客户确认了是否是支原体污染,截图如下:
图7 和客户的聊天截图
通过这个案例分析,我们推测,大家所俗称的原地颤动的“黑胶虫”污染极有可能是支原体污染,而这些颤颤巍巍的小圆点极有可能是支原体集落。未来,我们会收集大量的这种原地颤动的小黑点样本,做测序鉴定,进一步用大数据证实咱们的推测,把这些有意思的结果分享给大家。
如果您的细胞真的“中镖”了,也不要怕,我们的支原体杀除试剂为您的细胞披荆斩棘,保驾护航。
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3. 活性成分为多肽类,不会产生耐药性;
4. 对细胞几乎无毒性,在 100 多种细胞上进行过验证,包括但不限于 HEK293、Hela、MCF-7、MRC-5、NIH-3T3、CCC-ESF、CHO-S、CHO-K1、CHO-DG44、H295R、HL-60、K562、MDA-MB-231、SP2/0、T47D、BM 和 BV2 等;
5. 广谱性,可替代双抗,可以清除常见的革兰氏阴性和阳性菌;
6. 可直接加入血清、培养基中,用于清除支原体污染。
本期讲解就到这里了,如有细胞培养问题,欢迎扫码加入我们微信群交流。